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탈세포화된 근육 세포외기질의 수용성 및 불용성 분획이 중간엽 줄기세포 행동과 근육 분화에 미치는 차별적인 역할 : 수용성 및 불용성 분획이 중간엽 줄기세포 행동과 근육 분화에 미치는 차별적인 역할

Differential Roles of Soluble and Insoluble Fractions of Decellularized Muscle Extracellular Matrix in Mesenchymal Stem Cell Behavior and Muscle Differentiation

초록/요약

탈세포화된 근육 세포외기질 (DMECM)은 손상된 근육 조직의 재생과 기능 회 복을 위한 유망한 생체 재료로 주목 받고 있다. 이전 연구들은 DMECM이 내인성 줄기세포의 유도, 세포 증식, 부착을 촉진하며, 세포 분화를 조절하는 역할을 한 다고 보고하였다. 그러나 이러한 반응을 유도하는 DMECM의 구체적인 성분은 아직 명확히 밝혀지지 않았다. 본 연구는 DMECM의 수용성 성분 (SF-DMECM) 과 불용성 성분 (IF-DMECM)이 중간엽 줄기세포(MSCs)의 증식, 이동, 부착, 근육 분화에 미치는 차별적인 역할을 조사하고자 하였다. 분석 결과, SF-DMECM은 MSCs의 증식과 이동을 촉진하며, IF-DMECM은 세포 부착을 강화하고 근육 분화를 유도하는 효과를 보였다. 이러한 결과는 DMECM의 수용성 및 불용성 성분이 근육 재생에 서로 보완적인 역할을 한다는 것을 시사하며, 향후 근육 치료에 활용될 가능성을 제시한다.

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목차

제 1 장 서론 1
제 1 절 연구 배경 및 목적 1
제 2 장 연구방법 4
제 1 절 연구 재료 및 방법 4
1. 실험 재료 4
가. 화학 물질, 시약 및 조직 4
나. 탈세포화 근육 세포외기질 (DMECM), 불용성 DMECM (IF-DMECM) 및 수용성 DMECM (SF-DMECM)의 제작 4
2. 실험 방법 7
가. 물리화학적 특성 분석 7
(1) 주사전자현미경(Scanning Electron Microscope, SEM) 분석 7
(2) 조직학적 특징 분석 7
나. 생화학적 특성 분석 8
(1) SDS-PAGE 8
(2) 수용성 단백질 정량 분석 9
(3) dsDNA 정량 분석 9
(4) 콜라겐 정량 분석 10
(5) sGAG 정량 분석 10
다. 세포 배양 11
라. 줄기 세포 거동 평가 11
(1) Live & Dead assay 11
(2) CCK assay 12
(3) 줄기세포의 화주기성 평가 13
(4) 세포 부착능 평가 14
마. 줄기세포에 대한 DMECM의 근육 분화 유도능 평가 15
(1) Western Blot 15
(2) Immuno-cytochemistry 15
바. 통계 분석 16
제3장 연구 결과 17
제1절 근육 유래 탈세포화 세포외기질 분획물의 물리화학적 특성 분석 17
제2절 근육 유래 탈세포화 세포외기질 분획물의 생화학적 특성 분석 20
제3절 근육 유래 탈세포화 세포외기질 분획물 처치에 따른 줄기세포 거동 분석 22
가. 근육 유래 탈세포화 세포외기질 분획물의 세포 적합성 평가 22
나. 근육 유래 탈세포화 세포외기질 분획물의 줄기세포에 대한 화주기성 평가 24
다. 근육 유래 탈세포화 세포외기질 분획물의 줄기세포에 대한 세포 부착능 평가 27
제4절 근육 유래 탈세포화 세포외기질 분획물 처치에 따른 줄기세포 근육 분화능 분석 29
제4장 고찰 33
제5장 결론 38
Reference 39
Abstract 46

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