간세포암종에서 RRM2와 세포 내 CTNNB1 핵 전이의 관계성 규명
- 주제(키워드) CTNNB1 , RRM2 , 돌연변이 , 핵 전이 , 간암 , 상호작용
- 주제(DDC) 570
- 발행기관 아주대학교 일반대학원
- 지도교수 우현구
- 발행년도 2024
- 학위수여년월 2024. 8
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 일반대학원 의생명과학과
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/ajou/000000033966
- 본문언어 한국어
- 저작권 아주대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
초록/요약
CTNNB1은 다양한 암 유형에서 종양 발생에 관여된 것으로 알려져 있으며, 특히 CTNNB1 변이에 의한 핵 전이가 중심이 되고 있다. 본 연구는 간암 세포주에서 CTNNB1 변이에 의한 핵 전이와 ribonucleotide reductase regulatory subunit M2 (RRM2)의 관계성을 조사하였다. 첫 번째로 세포 구체형성 및 세포 침습 분석의 표현형 분석 결과에서 간암 세포주에서 RRM2를 억제하면 CTNNB1 돌연변이 (p.W25_I140del, p.S37C)를 가진 세포에서의 성장이 현저히 감소되었다. 두 번째로 분자 생물학적 분석에서 RRM2의 발현변화가 CTNNB1 돌연변이를 가진 세포에 있어 세포증식, 세포생존, 세포사멸 (p-ERK, p-AKT, p-PARP1)를 조절하는 것을 확인할 수 있었으며, RRM2의 억제는 CTNNB1 돌연변이 세포에서의 CTNNB1 핵 전이의 강한 감소를 관찰하였다. 세번째로 면역세포화학 분석을 통해 CTNNB1변이 세포에서 RRM2 억제에 따른 강한 CTNNB1의 핵 내 발현 감소를 형광을 통하여 확인하였으며, 면역 침강 분석을 통해 RRM2와 CTNNB1간의 상호작용을 확인하였다. 결과적으로 RRM2가 CTNNB1핵 전이에 관여하는 것으로 보이며, 특히 CTNNB1돌연변이 간암 세포주에서 좀더 강한 CTNNB1 핵 전이를 RRM2를 표적 함으로써 조절할 수 있을 것으로 생각되며 간암 치료 약물 개발에 유망할 수 있음을 시사한다.
more목차
Ⅰ. 서 론 1
Ⅱ. 재료 및 방법 3
2.1 세포 주 배양 3
2.2 RRM2 의 발현조절 3
2.3 세포 표현형 분석 4
2.5 정량적 PCR 분석 5
2.6 면역세포화학 및 이미징 8
2.7 면역분석 9
2.8 통계 및 재현 가능성 12
Ⅲ. 결과 13
3.1 간암세포에서 RRM2 의 세포생존율 및 세포 사멸에 미치는 영향 13
3.2 간암세포에서 RRM2 의 세포 구체형성에 미치는 영향 15
3.3 RRM2 발현 변화와 CTNNB1 돌연변이에 따른 세포 침습 측정 17
3.4 CTNNB1 변이와 RRM2 발현에 따른 분자 생물학적 특성 분석 조사 20
3.5 RRM2 발현조절은 CTNN1 변이 유무에 따른 핵 전이 조절 25
3.6 RRM2 발현 변화와 CTNNB1 변이 유무에 따른 핵내 CTNNB1 발현 30
3.7 간암 세포에서 CTNNB1 변이 유무와 RRM2 의 상호작용 35
Ⅳ. 고찰 38
Ⅴ. 결론 40
Ⅵ. 참고문헌 41
영문요약 47
