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2'-푸코실락토오스의 자가포식을 통한 멜라닌 감소 연구

A Study on Melanin Reduction through Autophagy by 2'-Fucosyllactose

초록/요약

2'-fucosyllactose (2'-FL)는 사람의 모유에 가장 많이 존재하는 올리고당 (human milk oligosaccharides, HMOs)으로, 장내 유용 미생물의 성장을 촉진 시키고 알레르기, 염증 반응을 완화시키는 것에 도움을 준다. 다양한 긍정적 기능을 가진 2'-FL의 미백 화장품 소재로써의 가능성을 확인하고자, 본 연구를 통해 멜라닌 생성 저해 효능 및 자가포식 유도 가능성을 검토하였다. 인간 유래 멜라닌 생성 세포로 알려진 MNT-1 세포에서 독성 실험을 진행하여 40 g/L 이하에서 세포독성이 없음을 확인하였고, 동일 세포에서 20 g/L 농도로 7 일간 처리하여 멜라닌 생성량을 분석한 결과, 40% 멜라닌 생성 감소를 확인하였다. 멜라닌 생성 관련 인자 TYR 및 TYRP1의 단백질 발현량을 western blot 법을 이용하여 분석한 결과, 2'-FL 처리는 이들을 감소시켰으며, 더불어 자가포식 표지자인 microtubule-associated protein 1 light chain 3 (LC3)의 형태가 LC3-Ι에서 LC3-Π로 변환을 확인할 수 있었다. 공초점 현미경을 통해 2'-FL 처리에 따른 LC3 puncta의 증가가 확인되었다. 따라서, 2'-FL로 활성화된 자가포식이 TYR 및 TYRP1 단백질 발현량을 저해시킴으로써 멜라닌 생성을 감소시키는 것으로 시사된다. 결론적으로 2'-FL은 자가포식을 유도하여 멜라닌 생성이 억제됨이 확인되어 미백 화장품 소재로써의 가능성이 기대된다.

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초록/요약

2'-fucosyllactose [2'-FL] is the most abundant human milk oligosaccharide [HMO] present in breast milk, promoting the growth of beneficial microorganisms in the gut and aiding in the relief of allergic and inflammatory reactions. In this study, the anti-melanogenic effects of 2'-FL, and its potential for application in whitening cosmetics, were evaluated. MTT assay was performed on MNT-1 cells, human-derived melanocytes. 2'-FL was treated and replaced at 48 h intervals for 7 days, and it was confirmed that there was no cytotoxicity at 20 g/L or less, while a 40% reduction in melanin production was also observed. western blot analysis of TYR and TYRP1, factors involved in melanogenesis, revealed that 2'-FL treatment reduced their expression levels. In addition, 2'-FL application and observation of the autophagy marker microtubule-associated protein 1 light chain 3 [LC3] revealed it was converted from LC3-Ι to LC3-Π, indicating increased autophagy. Likewise, confocal microscopy revealed an increase in LC3 puncta after 2'-FL treatment. Therefore, it is suggested that 2'-FL-mediated activation of autophagy reduces melanogenesis by inhibiting the expression levels of TYR and TYRP1 proteins. In conclusion, it was confirmed that 2'-FL induces autophagy and suppresses melanin production, so its potential as a whitening cosmetic material is expecte

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목차

Ⅰ. 서론 1
Ⅱ. 실험 방법 3
A. 시약 3
B. 세포배양 4
C. 세포 생존능(Cell Viability) 측정 4
D. 멜라닌 감소 측정 5
E. Western Blot을 통한 단백질의 발현 측정 5
F. 면역형광염색법(Immunofluorescence) 6
G. 통계처리 7
Ⅲ. 결과 및 고찰 8
A. 2'-FL 농도에 따른 세포 생존능(Cell Viability) 측정 8
B. 2'-FL로 인한 멜라닌 정량 10
C. MNT-1 세포에서의 TYR 및 TYRP1 단백질 발현 12
D. 2'-FL 처리에 의한 자가포식 변화 관찰 14
Ⅳ.결론 16
Ⅴ. 참고 문헌 17

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