황칠 다당체의 화학구조와 생리활성에 관한 연구
- 발행기관 아주대학교
- 지도교수 백승훈
- 발행년도 2015
- 학위수여년월 2015. 2
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 일반대학원 약학
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/ajou/000000019534
- 본문언어 한국어
- 저작권 아주대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
초록/요약
황칠은 두릅나무 과에 속하는 아열대성의 넓은 잎의 상록교목인Dendropanax morbifera의 잎을 이용한 생약으로서 민간치료제로 사용되어왔으나, 그에 대한 생리활성 연구는 많이 부족한 상태이다. 이번 연구에서 황칠 다당체의 구조적인 특성과 항대장암 활성에 대해 확인 하고자 하였다. 잘 건조된 황칠 잎을 갈아주고, 열탕 추출법, sevag처리, EtOH침전, 원심분리, 동결건조의 과정을 거쳐준다. 이렇게 얻어진 수용성 황칠 다당체를ion exchange chromatography (IEC), size-exclusion chromatography (SEC) 과정을 통해 각 분획을 분리시킨다. 정제된 다당체를 gel permeation chromatography (GPC), gas chromatography (GC), fourier transform infrared spectroscopy (FT/IR) 등을 통해 구조를 분석하였다. 또한, 정제된 다당체의 항대장암 효과를 확인하기 위해 대장암세포 (SW480)에 투여하여 각 소분획의 항대장암 효과를 검토하였다. GPC 결과 DMP-c2, -c4, -d2, -e2 의 molecular weight는 각각 49.4, 4.5, 5.5, 5.8 kDa의 값을 가지며 FT-IR을 통해3408.04~3446.26 cm-1와 1250.41~1278.90 cm-1에서 강한 hydroxyl 기와 carbonyl기를 확인했으며, GC 결과 각 다당체는 galactose (Gal), glucose (Glc), galacturonic acid (GlcA) 가 주성분인 산성 다당체 화합물임을 확인할 수 있었다. 또한 DMP-c2, -c4, -d2, -e2의 대장암세포 (SW480)에 MTT 처리결과, DMP-c2, -d2는 0.5 mg/ml에서 높은 항대장암 효과를 보이는 것을 확인할 수 있었다.
more목차
목차
국 문 초 록 i
목 차 iii
List of figures vi
List of tables vii
List of abbreviations viii
I. 서 론 1
1. 황칠. 1
1-1. 황칠의 기원, 약용 역사 및 일반적 특징 1
1-2. 성분 및 약리작용 1
2. 대장암의 일반적 특성, 발병원인 2
2-1. 대장암의 일반적 특성 2
2-2. 대장암의 발병원인 3
3. 연구목표 4
II. 실 험 방 법 5
1. 실험 재료, 시약 및 기기 5
1-1. 실험 재료 5
1-2. 시약, 기구 및 기구 5
1-2-1. 시약 및 기구 5
1-2-2. 기기 6
2. 세포 배양 및 MTT cell viability assay 7
2-1. 세포 배양 7
2-2. 약물 처리 및 MTT cell viability assay 7
3. 황칠 다당체의 추출, 분획 및 활성 성분의 분리 8
3-1. 황칠 다당체의 추출 및 EtOH 침전 다당체 분획 제조 8
3-2. Total carbohydrate, Uronic acid, Protein 정량 8
3-2-1. Total carbohydrate 정량법 (Phenol-sulfuric acid method) 8
3-2-2. Uronic acid 정량법 (Carbazole method) 9
3-2-3. Protein 정량법 (Bradford method) 10
3-3. Ionexchange chromatography (IEC) 10
3-4. Size exclusion chromatography (SEC) 10
4. 분자량 측정 (GPC) 11
5. 구성 단당류의 함량 분석 11
5-1. Carboxyl-reduced다당체의 제조 12
5-2. Alditol acetate제조 12
5-3. GC/MS 13
6. 적외선 흡수 분광법 (FT/IR) 14
III. 결과 및 고찰 15
1. 황칠 다당체 추출물의 제조와 항대장암 활성 15
2. 항대장암 활성 유효 다당체 성분의 분리 15
3. 정제된 다당체의 항대장암 활성 17
4. 항대장암 활성 다당체의 분자량 측정 (GPC) 17
5. 항대장암 활성 다당체의 구성당 분석 18
6. 항대장암 활성 다당체의 자외선 흡수 분광법 (FT/IR) 18
IV. 결 론 33
V. 참고문헌 34
Abstract 37
