DNA 손상 신호 체계에서 크로마틴 리모델링 인자인 Rsf-1의 역할
- 주제(키워드) DNA damage , chromatin remodeling factor , Rsf-1 , PARP1 , DNA damage checkpoint
- 발행기관 아주대학교
- 지도교수 조혜성
- 발행년도 2014
- 학위수여년월 2014. 2
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 일반대학원 의생명과학과
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/ajou/000000016596
- 본문언어 한국어
- 저작권 아주대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
초록/요약
RSF 복합체는 뉴클레오솜 이동에 관여하는 크로마틴 리모델링 인자로서 ATPase 효소 기능을 가지고 있는 SNF2h와 Rsf-1으로 구성되어 있다. 크로마틴 리모델링 인자들은 DNA 상에서 뉴클레오솜을 이동시키거나 뉴클레오솜을 구성하는 히스톤을 교체함으로써 DNA 복제과정이나 RNA 합성과정에 영향을 미친다는 것이 알려져 있다. 최근에 크로마틴 리모델링 인자들이 DNA 손상 시 신호 체계나 손상 복구에 관여한다는 것이 보고되기 시작하고 있다. 본 연구에서는 Rsf-1이 DNA 손상 신호에 관여하는 지 그리고 그 작용기전에 대해 연구하고자 하였다. Rsf-1이 DNA 손상에 관여하는지를 알아보기 위한 방법으로 우선 DNA 손상부위로 이동하는 지를 조사하였다. Laser microirradiation방법을 사용하여 DNA에 손상을 준 부위에 Rsf-1이 이동하여 축적되는 것을 관찰하였다. 또한, FokI system을 이용하여 살아있는 세포의 염색체 특정부위에 이중나선절단을 유도하였을 때에도 Rsf-1이 DNA 손상부위에 축적되었다. Rsf-1이 DNA 손상부위에 축적되는 것은 결합체인 SNF2h 비의존적으로 일어나며, Rsf-1의 PHD (plant homeodomain)도메인이 중요하다는 것을 확인하였다. 또한 DNA 손상신호의 초기 마커인 γ-H2AX보다 빨리 DNA 손상부위로 이동하고, Rsf-1의 발현이 저하된 경우에는 γ-H2AX의 축적이 저하되는 것으로 보아 DNA 손상시 초기에 작용할 것으로 예상된다. 흥미롭게도Rsf-1이 빠른 시기에 축적이 되는 것은 PARP1 억제제를 통하여 PARP1 활성에 의존하여 이루어진다는 것을 관찰하였다. 따라서 본 연구는 Rsf-1이 DNA 손상 신호 체계에 관여하며 PARP1 활성에 의해 DNA 손상 부위로 모이게 되고 DNA 손상 신호를 조절한다는 것을 밝히고 있다.
more목차
국문요약
차례
그림차례
Ⅰ. 서론
Ⅱ. 재료 및 방법(혹은 연구대상 및 방법)
A. Cell culture, reagent and treatment
B. Plasmids and RNA interference
C. Laser micro-irradiation
D. Immunofluorescence microscopy
E. Antibodies
F. FokI assay
G. Survival assay
Ⅲ. 결과
A. Rsf-1 is accumulated to the regions of DNA damage and remained
B. Rsf-1 is recruited to the DNA damage sites
C. Rsf-1 contributes to SNF2h recruitment to DNA damage sites
D. Assembly of γ-H2AX at the DSB-flanking chromatin is regulated by Rsf-1
E. Rsf-1 accumulation at the DNA damage sites requires PARP1 activity
F. PHD domain of Rsf-1 is required for the DNA damage response
G. Depletion of Rsf-1 diminishes cell survival and DNA damage checkpoint signals
Ⅳ. 고찰
Ⅴ. 결론
참고문헌
ABSTRACT
