한약재 추출물에 의한 Mouse hepatitis Virus A-59의 증식억제와 기작규명
In Vitro Inhibition of Mouse Hepatitis Virus A-59 Replication by Medicinal Herbal Extract.
- 주제(키워드) Mouse hepatitis virus , medicinal herbal extract , minus strand RNA
- 발행기관 아주대학교
- 지도교수 김경민
- 발행년도 2011
- 학위수여년월 2011. 8
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 일반대학원 의생명과학과
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/ajou/000000011917
- 본문언어 한국어
- 저작권 아주대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
초록/요약
현재까지의 연구에서 승마 (cimicifuga fhizoma), 고련피 (meliae cortex), 황련 (coptidis rhizoma), 황백 (phellodendeon cortex), 고삼 (sophorae radix), 오가피 (acanthopanacis cortex), 지유 (sanguisorbae radix), 사상자 (torilis fructus)가 항 코로나 바이러스 효과가 있다고 보고되었다. 본 연구에서는 TCM-33이 in vitro에서 항 코로나바이러스 효과가 있는지 알아보고자 하였다. TCM-33는 마우스 간염바이러스 (mouse hepatitis virus-A59, MHV-A59)의 생산을 억제 하였으며, TCM-33의 농도에 따라 MHV-A59의 증식이 억제되었다. 이때, 바이러스의 mRNA와 단백질 합성이 현저히 감소하였다. TCM-33의 EC50(effective concentration)과 CC50(cytotoxic concentration)는 각각 4.8±1.4μg/ml, 519.7±50.3μg/ml이고, SI (selectirity index)는 107.6이었다. TCM-33의 항 코로나바이러스 효과의 기작을 알아보기 위하여 TCM-33이 MHV-A59 증식단계 중 어느 단계에서 효과를 나타내는지 관찰하였다. TCM-33이 바이러스 진입에는 부분적으로 영향을 미칠 것으로 추정되지만, 주요 기작은 아니라고 생각되었다. 또한 TCM-33은 바이러스의 음성가닥 RNA 합성을 현저하게 감소시켰으나 세포의 단백질 합성은 감소하지 않았다. 따라서 바이러스의 초기 단백질 합성에는 영향이 거의 없을 것으로 추정하였다. 즉, TCM-33이 아마도 MHV-A59 증식에서 초기 단계에 억제 효과를 보이는 것으로 생각되며, 비구조 protein processing 과/또는 RNA 합성일 것으로 추정하였다.
more목차
Ⅰ. 서론 1
Ⅱ. 재료 및 방법 10
A. 세포 배양과 바이러스 10
B. 한약재 추출물 10
C. plaque assay 10
D. MTT assay 11
E. Intracellular RNA 추출과 Northern blot 11
F. SDS-PAGE와 Western blot 12
G. RNA 추출과 RT-PCR 12
H. Virion 분리 및 RNA 추출 13
I. 세포의 단백질 합성조사 14
J. Preteinase 억제제 실험 15
Ⅲ. 결과 16
A. TCM-33 추출물에 의한 바이러스 생산에 미치는 영향 16
B. TCM-33추출물에 의한 바이러스 진입 (entry)에 미치는 영향 22
C. TCM-33 추출물에 의한 음성가닥 RNA 합성의 영향 27
D. TCM-33 추출물에 의한 세포 내 단백질 합성의 영향 30
E. non-structural protein processing에 의한 RNA합성 33
Ⅳ. 고찰 35
Ⅴ. 결론 40
