폴리페놀과 알칼로이드가 대식세포의 항미생물 활성 및 염증관련 물질생산에 미치는 영향
Effects of phenolic compounds on antibacterial activity and inflammation - related substances production in macrophage
- 발행기관 亞洲大學校 大學院
- 지도교수 南碩鉉
- 발행년도 2005
- 학위수여년월 2005. 8
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 일반대학원 생영과학과
- 본문언어 한국어
초록/요약
본 실험에서는 충치 치료제의 대체 화합물을 찾고자 항균효과가 알려진 식물 유래의 폴리페놀과 알칼로이드를 대상으로 대식세포(RAW264.7)의 섭식작용과 부착능력을 측정하고 또한, 치주염과 같은 염증관련 질환에도 효과가 있는지를 알아보고자 reactive oxygen species(ROS)의 생산, nitric oxide(NO)의 억제, matrix metalloproteinase(MMP)-9 및 염증관련 사이토카인과 같은 치주염에 관련된 유전자의 발현을 조사하였다. 17종의 폴리페놀과 알칼로이드에 대해 위의 실험들을 측정한 결과, berberine chloride는 부착능력과 섭식능력에서 상관관계를 보였으며 ROS와 NO억제에도 효과를 보여주었다. 그러나 염증관련 사이토카인과 MMP-9 발현에 대한 억제활성은 발견되지 않았다. catechin gallate와 Rutin은 섭식능력과 ROS억제 효과를 보였고, ferulic acid와 cinnamic acid는 ROS와 NO억제에 효과가 있었다. Epigallocatechin gallate(EGCg)를 비롯한 catechin 종류는 MMP-9과 사이토카인을 억제하였으며, 특히 EGCg는 MMP-9과 사이토카인들의 발현을 거의 절반가량 억제하는 것으로 나타났다. 이상의 결과들은 catechin gallate, rutin, ferulic acid, cinnamic acid, EGCg와 같은 폴리페놀과 Berberine chloride와 같은 알칼로이드는 현재 사용되고 있는 구강질환 치료제의 대체 화합물로 사용될 수 있는 가능성을 보여주었다.
more초록/요약
In this study, using antibacterial polyphenols and alkaloids derived from plants, the effects on phagocytosis and adherence were studied in cultured RAW264.7 cells for finding substitute compounds for oral disinfectants. Moreover, effects on ROS production, NO inhibition, MMP-9 and cytokine expression were studied if they have effect on inflammatory disease such as periodontitis. According to the research of seventeen polyphenols and alkaloids, berberine chloride has correlation between adherence and phagocytosis. Also, it inhibits production of ROS and NO. But it has no inhibition of inflammatory cytokines and MMP-9 expression. Catechin gallate and rutin have effects on phagocytosis activity and ROS inhibition. Ferulic acid and cinnamic acid have effect on ROS and NO inhibition. Catechins inhibit MMP-9 and cytokine experession, especially, EGCg show inhibition about fifty percents on MMP-9 and cytokine expression. This results show potential that alkaloid such as berberine and polyphenols such as catechin gallate rutin, ferulic acid, cinnamic acid and EGCg will be alternative therapeutic substance on oral disease.
more목차
목차
국문요약 = ⅰ
감사의글 = ⅱ
목차 = ⅲ
List of Figure = ⅴ
List of Table = ⅵ
Ⅰ. 서론 = 1
Ⅱ. 재료 및 방법 = 7
1. 재료 = 7
1-1. 시료 및 시약 = 7
2. 방법 = 8
2-1. 배양 = 8
2-2. Minimum inhibitory concentration(MIC) 측정 = 8
2-3. cell viability 측정 = 8
2-4. Adherence assay = 9
2-5. Candidacidal assay = 9
2-6. Reactive oxygen species(ROS) 측정 = 10
2-7. Nitric oxide 측정 = 11
2-8. Zymography를 이용한 MMP-9의 활성 측정 = 11
2-9. RT-PCR을 통한 Cytokine과 염증관련 유전자의 발현조절 측정 = 12
Ⅲ. 결과 및 고찰 = 14
1. 항균실험 = 14
1-1. 폴리페놀과 알칼로이드 자체의 직접적인 항균력 측정 = 14
1-2. 대식세포의 섭식작용에 의한 간접적인 항균력 측정 = 18
1-2-1 부착력 측정 = 18
1-2-2 대식세포(RAW264.7)을 이용한 섭식능력 측정 = 19
2. 염증관련 실험 = 25
2-1. 각 시료에 따른 Reactive oxide Species(ROS) 소거능력 측정 = 25
2-2. 각 시료에 따른 Nitric oxide(NO) 소거능력 측정 = 28
2-3. 각 시료에 따른 MMP-9의 발현 조절 측정 = 32
2-4. RT-PCR을 이용한 사이토카인과 염증관련 유전자 발현 측정 = 34
Ⅳ. 토의 = 40
Ⅴ. 결론 = 44
Ⅵ. 참고문헌 = 49
Abstract = 53
