원료의약품 합성과정에서 발생하는 불순물인 포름알데하이드 검출을 위한 고성능액체크로마토그래피 기반 분석법 연구
Study on the analysis method based on high- performance liquid chromatography for the detection of Formaldehyde, an impurity
- 주제(키워드) method validation
- 주제(DDC) 500
- 발행기관 아주대학교 공학대학원
- 지도교수 김은하
- 발행년도 2024
- 학위수여년월 2024. 2
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 공학대학원 화학생명공학과
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/ajou/000000033490
- 본문언어 한국어
- 저작권 아주대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
초록/요약
포름알데하이드(Formaldehyde)는 의약품국제조화위원회(International Council for Harmonization of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use, ICH) 가이드라인 S2에 따라 안정성 평가에서 발암성과 유전 독성이 있는 물질로 분류되어 있다. 그러나 ICH 가이드라인 M7에서는 경구 투여 약물의 발암성 평가를 다 루고 있어, 해당 가이드라인에서는 포름알데하이드는 경구성 발암 물질로 간주되지 않 는다. 포름알데하이드는 메탄올(Methanol)의 산화된 형태로, 메탄올은 ICH 가이드라인 Q3C에 따라 잔류용매로서 3,000 ppm의 기준치로 제한되어 있다. 따라서 포름알데하 이드도 관리가 필요한 경구성 물질로 인식되어야 한다. 본 연구에서는 요산 합성 억제제(Xanthine oxidase inhibitor, XOI)인 페북소스타 트(Febuxostat) 제제의 원료 합성 과정에서 사용되는 헥사메틸렌테트라민 (Hexamethylenetetramine, HMT)의 가수분해 과정으로 발생할 수 있는 포름알데하 이드의 양을 정량 분석하는 신규 분석법을 개발하고 타당성을 검증하였다. 이를 위해 1260 Infinity II Variable Wavelength Detector (VWD)가 달린 고성능 액체 크로마 토그래피(High performance liquid chromatography, HPLC) 분석 시스템을 사용하 였다. 또한, 페북소스타트 일일 복용량을 기준으로 포름알데하이드의 관리 기준치를 설 정하였다. 인체 노출 허용량(TDI, Tolerable Daily intake) 기준 메탄올은 500 μ g/kg bw/day, 포름알데하이드는 200 μg/kg bw/day으로, 메탄올 기준 3,000 ppm을 고려하여 1,200 ppm으로 고려할 수 있다. 일일 허용 노출량(PDE, Permissible Daily Exposure) 기준 메탄올은 30 mg, 포름알데하이드는 10 mg으로, 포름알데하이드의 기준치를 1,000 ppm으로 설정 가능하다. 또한, 반수 치사량(LD50, Lethal Dose 50) 경구 투여 기준, 메탄올 1,187 mg/kg, 포름알데하이드 460 mg/kg로 포름알데하이드 의 기준치를 약 1,160 ppm으로 설정할 수 있다. 본 연구에서는 PDE를 고려하여 기준 치를 1,000 ppm으로 설정하였으나, 관리 강화를 위해 500 ppm으로 변경하였다. 본 연구에서 개발된 분석법은 식약처의 ‘의약품 등 시험방법 밸리데이션 가이드라인 해설서’에 따라 직선성(Linearity), 정밀성(Precision), 정확성(Accuracy), 용액의 안정성(Solution stability) 등을 확인하여 분석법의 타당성을 검증하였다. 검증 결과, 범위는 50.14 ~ 601.64 ppm (Quantitation limit to 120% of the specifications), 상관계수(r2) 값 0.999 로 우수한 직선성을 나타내었다. 정확성 시험에서는 99.0 ~ 100.83%의 결과를 얻었으며, 평균 회수율은 100.0%임을 확인하였다. 95% 신뢰구간은 98.993 ~ 101.077%를 나타냈다. 정밀성 시험에서는 상대표준편차(%RSD)가 0.47%로 확인되었다. 이에 따라 본 연구에서 수행한 타당성 검증은 식약처의 ‘의약품 등 시험방법 밸리데이션 가이드라인 해설서'의 기준을 충족하였으며, 해당 시험법이 포름알데하이드의 경구 투여 약물로서 품질관리에 적용될 수 있는 가능성을 확인하였다.
more목차
I. 서론 1
1.1 고요산혈증의 원인과 치료에 있어 페북소스타트의 필요성 1
1.2 페북소스타트 원료 제조시 포름알데하이드 발생 가능성과 검출 필요성 3
1.3 연구의 목적 6
II. 본론 7
2.1 시약 및 기구 7
2.1.1 시약 및 표준 물질 7
2.1.2 분석기구 7
2.1.3 시액의 조제 8
2.2 분석 조건 10
2.2.1 기기분석 조건 10
2.2.2 분석법 설정 10
2.3 밸리데이션(Validation) 항목 12
III. 결과 및 고찰 14
3.1 포름알데하이드의 관리 기준 설정 14
3.2 분석법 확립 16
3.3 밸리데이션 18
3.3.1 직선성과 범위 18
3.3.2 정확성 20
3.3.3 정밀성 22
3.3.4 용액의 안정성 23
IV. 결론 25
참고문헌 26
