류마티스 관절염 환자의 T 세포에서 CMKLR1의 발현과 역할 규명
- 주제(키워드) 류마티스 관절염 , 고도 분화된 T 세포 , 케모카인 수용체
- 주제(DDC) 570
- 발행기관 아주대학교
- 지도교수 박선
- 발행년도 2022
- 학위수여년월 2022. 2
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 일반대학원 의생명과학과
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/ajou/000000031768
- 본문언어 한국어
- 저작권 아주대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
초록/요약
지방세포와 수지상세포 등에서 발현되는 chemerin chemokine like receptor 1(CMKLR1)은 chemotaxis와 염증성 사이토카인의 생성을 유도한다고 알려져 있다. 그러나, 고도 분화된 T 세포에서 CMKLR1의 발현 및 기능에 대한 연구가 진행된 바 없다. 고도 분화된 T 세포는 RA에서 빈도가 증가된다고 보고되었으므로, 본 연구에서는 건강한 성인과 류마티스 관절염 환자의 말초혈액에서 분리한 단핵세포를 사용하여 고도 분화된 T 세포에서 CMKLR1의 발현과 기능에 대한 연구를 진행하였다. 이미 알려진 바와 같이 고도 분화된 CD4+ T 세포는 HC보다 RA에서 빈도가 더 높은 것이 확인되었다. 고도 분화된 CD8+ T 세포 중 CMKLR1을 발현하는 세포 빈도는 RA에서 더 낮은 것을 알 수 있었으며, 회귀분석을 통해 해당 세포와 고도 분화된 CD4+ T 세포는 RA의 질병활성도에 영향을 미치는 것으로 나타났다. CMKLR1의 리간드인 chemerin은 HC과 비교했을 때 RA의 혈액에서 농도가 더욱 높은 것으로 관찰되었다. Chemerin의 농도에 따라 CMKLR1 발현 세포주가 이동했으며, 이와 같은 움직임은 CMKLR1의 길항제인 α-NETA를 처리함으로써 억제되었다. 또한 CD8+ T 세포를 분리하여 chemerin으로 자극했을 때, 고도 분화된 세포에서 TNF-α 생성이 증가하였고, α-NETA를 처리함으로써 TNF-α 생성이 억제됨을 확인했다. 이를 종합했을 때, 본 연구 결과는 고도 분화된 T 세포의 CMKLR1 발현이 류마티스 관절염의 병인에 기여할 가능성을 제시하며, CMKLR1을 이용하여 고도로 분화된 T 세포를 조절할 수 있을 것을 제시한다.
more목차
I. 서론 1
II. 재료 및 방법 4
A. 연구 대상 선정 기준 및 제외 기준 4
B. 말초혈액단핵세포(PBMC)의 분리 6
C. CD8+ T 세포의 분리 6
D. CMKLR1 자극에 따른 TNF-α 생산 분석 7
E. 유세포분석(Flow cytometry) 7
1) Ex vivo 표현형 분석 7
2) CMKLR1 자극 또는 억제 후 TNF-α 발현 분석 9
F. 혈장 chemerin 농도 분석 9
G. CMKLR1 과발현 세포주 확립 9
H. Migration 12
III. 결과 13
A. 류마티스 관절염 환자의 말초혈액에서 고도 분화된 T 세포의 빈도 분석 13
B. 말초혈액의 T 세포 아군에서 CMKLR1과 CX3CR1의 발현 분석 16
C. 류마티스 관절염 환자 활액의 T 세포 아군 분석 18
D. 고도 분화된 CD4+ T 세포의 빈도와 류마티스 관절염 환자의 질병 활성도의 음의 상관관계 20
E. Chemerin에 의한 CMKLR1 발현 T 세포주의 이동 23
F. 고도 분화된 T 세포의 TNF-α 발현 분석 27
G. CD8+ T 세포의 TNF-α 발현에 미치는 chemerin의 역할 분석 31
IV. 고찰 38
V. 결론 43
참고문헌 44
ABSTRACT 48
