호흡기 상피세포에서 페퍼민트 추출물에 의한 항염 효능 연구
Inflammatory effect of extract Mentha piperita L. in respiratory epithelial cells
- 주제(키워드) Mantha piperita , MUC5AC , PMA , anti-inflammatory , airway , mucus , ERK , respiratory inflammatory disease , chronic bronchitis , asthma , mucin
- 발행기관 아주대학교
- 지도교수 정이숙
- 발행년도 2020
- 학위수여년월 2020. 2
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 글로벌제약임상대학원 글로벌제약임상약학과
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/ajou/000000029786
- 본문언어 한국어
- 저작권 아주대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
초록/요약
본 연구는 기관지 점액의 과다분비를 조절하는 후보소재로 페퍼민트 추출물의 유효성을 평가하고 호흡기 강장에 효능을 나타내는 기능성 소재로서 가능성을 알아보고자 하였다. 점액의 과다분비는 호흡기 질환에서 염증을 악화시키고 만성호흡기 질환의 발생위험을 증가시키므로 점액의 과다분비를 조절하는 것은 매우 중요하다. 본 연구는 만성호흡기질환 세포 모델에서 페퍼민트 추출물의 MUC5AC mRNA 발현 및 점액 단백질 분비에 대한 억제 효능을 확인하고, 그 효능 기전을 밝히고자 하였다. 먼저 인체유래 기도 상피세포 NCI-H292에서 PMA의 시간과 농도에 따른 MUC5AC 단백질 분비량 및 mRNA 발현양을 측정하고 다양한 농도의 페퍼민트 추출물 또는 ERK 억제제를 전 처리한 후, 다시 PMA로 자극하였다. 실험내용은 다음과 같다. ELISA를 이용하여 MUC5AC 단백질 생성을 측정하고 PMA에 의해 증가된 단백질에 페퍼민트 추출물이 영향을 미치는지 확인하였다. 페퍼민트 추출물은 PMA에 의해 증가된 MUC5AC 분비를 유의하게 억제하였다. RT-PCR을 이용하여 MUC5AC mRNA 발현이 PMA에 의해 증가되는 것을 확인하고, 페퍼민트 추출물을 농도별로 처리하여MUC5AC 유전자 발현을 억제하는지 조사한 결과 페퍼민트 추출물에 의해 MUC5AC mRNA 발현이 감소되었다. 페퍼민트 추출물의 MUC5AC mRNA 발현 및 단백질 분비를 억제하는 우수한 효능농도가 확인되었다. 페퍼민트 추출물의MUC5AC 분비 억제 기전을 밝히기 위해 Western blot분석을 사용하였다. 우선, MUC5AC 생성 기전을 알아보기 위해 ERK 경로를 확인한 결과 PMA에 의한 p-ERK 활성화를 확인하였고, 페퍼민트 추출물이 ERK 인산화에 영향을 미치는지 알아보기 위해 페퍼민트 추출물 또는 ERK 억제제를 처리하여 비교한 결과, 페퍼민트 추출물에 의해 ERK 인산화 감소가 확인되었다. 본 연구는 페퍼민트 추출물의 기관지 점액분비 개선 효능 및 그 작용기전을 검증함으로써 만성기관지염에 대한 호흡기능 개선 소재로서의 페퍼민트 추출물의 가능성을 제시하였다.
more목차
제1장 서론 1
1. 환경 오염과 호흡기 질환 1
2. 만성 기관지염 및 천식의 특징 3
2-1. 만성기관지염 3
2-2. 천식 5
3. 만성 기관지염 및 천식의 발병기전 9
3-1. 호흡기 기도 점액 9
3-2. MUC5AC 생성기전 13
4. 페퍼민트의 특징과 효능 16
5. 기능성 허브 18
6. 연구의 목적 20
제2장 재료 및 방법 21
1. 재료 21
2. 방법 22
2-1. PMA 염증 모델 22
2-2. Cell culture 22
2-3. 페퍼민트 추출물의 제조 23
2-4. ELISA 분석법을 이용한 mucin secretion 변화 측정 23
2-5. RT-PCR을 이용한 mRNA 발현 측정 24
2-6. Western Blot법을 이용한 ERK 인산화 측정 26
3. 통계 26
제3장 본론 27
1. NCI-292 세포에서 PMA 농도, 시간에 따른 mucin secretion의 증가 27
2. NCI-H292 세포에서 PMA의 의해서 증가된 mucin secretion에 대한 페퍼민트 추출물의 억제 효능 29
3. NCI-H292 세포에서 PMA의 농도, 시간에 따른 MUC5AC mRNA 발현 증가 31
4. NCI-H292 세포에서 PMA로 증가된 MUC5AC mRNA 발현에 대한 페퍼민트 추출물의 억제 효능 33
5. NCI-H292 세포에서 PMA로 증가된 ERK 변화 35
6. NCI-H292 세포에서 PMA로 증가된 ERK 인산화에 대한 페퍼민트 추출물의 억제 효능 37
제4장 고찰 39
제5장 결론 45
참고문헌 47
ABSTRACT 53
