활성화된 간 성상 세포 증식 조절을 통한 간 섬유화 개선
- 주제(키워드) 간 성상 세포
- 발행기관 아주대학교
- 지도교수 김홍표
- 발행년도 2018
- 학위수여년월 2018. 2
- 학위명 박사
- 학과 및 전공 일반대학원 약학과
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/ajou/000000027229
- 본문언어 한국어
- 저작권 아주대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
초록/요약
간 섬유화 과정에서 활성화된 간 성상 세포는 세포외 기질(Extracellular matrix)의 주 생산원이다. 다수의 논문에서 활성화된 간 성상 세포의 선택적 사멸은 간 섬유화를 개선할 수 있음을 보고하고 있다. 본 연구에서도 간 성상 세포의 증식 조절을 통해 간 섬유화를 개선하고자 한다. 첫 번째 개선 전략으로는 천연물들 중에서 선별하였으며 두 번째로는 논문을 근거로 새로운 물질을 합성하였다. 천연물들 중 물(H2O)의 유도체인 중수(D2O)을 선택하였다. 중수(D2O)가 처리된 간 성상 세포는 p53/p21 기작의 활성을 통해 cyclin-dependent kinase 2를 감소시켜 세포주기를 S단계에서 정지시킨다. 중수(D2O)에 의한 간 성상 세포증식 억제과정을 좀 더 명확하게 이해하고자 aquaporins(AQPs)에 중점을 두었다. 중수(D2O)에 의한 AQP11의 발현은 감소는 세포 증식 억제를 야기한다. 더불어, AQP11의 감소는 p53의 발현을 증가시킨다. 대조적으로, heme oxygenase-1의 증가는 중수(D2O)에 의해 세포 증식이 억제 되는 것을 막는다. 또한, 중수(D2O)가 처리된 간 성상 세포에서는 미토콘드리아 막 전위 손상 없이 [ATP]/[ADP]의 비율이 증가된다. 결과적으로, 중수(D2O)는 p53/p21의 기작을 통해 세포증식을 억제하며 이 과정에서 AQP11의 기작도 관련이 있어 보인다 두 번째로 구조-활성도 관계(structure–activity relationship)분석을 통하여 10개의 합성된 레스베라트롤 유도체들을 검사했다. 합성물들 중, 유도체 6이 간 성상 세포을 선별적으로 세포사멸을 유도한다. 또한 caveolin-1의 증가는 HO-1의 발현을 감소 시켜 세보 보호 활성을 감소 시킨다. 생체 내에서(in vivo), 유도체 6의 간 섬유화 개선 여부를 확인하기 위해서 담관 결찰에 의해 간 섬유화가 유도된 쥐에게 5 주 동안 20 ug/g 의 유도체 6을 경구 투여하였다. 그 후에, 본 연구는 콜라겐 측정 및 간 손상 분석을 통해 유도체 6이 투여된 쥐에서 간 섬유화의 감소를 확인하였다. 이는 유도체 6에 의한 선별적으로 간 성상 세포의 사멸을 통해 이루어진 것으로 보인다. 따라서 유도체 6은 잠재적 치료제의 가능성이 있다.
more목차
1. 서론 1
1-1. 간 섬유화 1
1-2. 연구 목적 7
2. 중수(D2O)의 간 성상 세포 증식 억제 9
1. 결과 및 고찰 9
2-1-1. 중수(D2O)는 p53/p21의 경로에 의해 세포주기를 정지시킨다 9
2-1-2. Aquaporin11은 간성상 세포 증식에서 중요하다 15
2-1-3. Heme oxygenase-1의 유도는 중수(D2O)의 세포증식억제 효과를 막는다 20
2-1-4. 세포 내 [ATP]/[ADP]의 과도한 비율 증가는 세포증식 억제에 기여한다 24
2-1-5. 중수(D2O)의 증식 억제는 자기소화작용(Autophagy)과 무관하다 27
3. 레스베라트롤(Resveratrol)유도체의 선별적 간 성상 세포 사멸 30
1. 결과 및 고찰 30
3-1-1. 유도체 6은 선별적으로 간 성상 세포 사멸을 유도한다 30
3-1-2. Heme oxygenase-1은 유도체 6에 의한 간 성상 세포사멸을 막는다 37
3-1-3. Caveolin-1의 증가는 HO-1의 활성을 억제한다 40
3-1-4. 유도체 6은 담관 결찰에 의한 간 섬유화를 개선시킨다 49
4. 실험 방법 및 재료 56
4-1. 연구 윤리 강령 56
4-2. 동물 실험 56
4-3. 담관 결찰 방법 56
4-4. 간 세포(Hepatocyte)배양 57
4-5. 세포 주와 배양 57
4-6. 시약 및 약품 58
4-7. 세포 증식 측정 58
4-8. 세포 사멸 분석 58
4-9. 세포 독성 분석 59
4-10. 웨스턴 블로팅 및 항체 59
4-11. 세포 내 [ATP]/[ADP]의 비율 측정 60
4-12. 세포 내 활성 산소 비율 측정 61
4-13 통계 분석 61
5. 참고 문헌 62
6. 약어 71
7. 영문 요약 72
